寻求抗体噬菌体展示及亲和力成熟技术

需求编号:D2019030129发布时间:2019-03-27所在地:省
研发经费:100-500万研发周期:3-6个月有效期:3-6个月

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需求描述

建立噬菌体库展示及抗体亲和力成熟技术平台,达到指标如下:

1、获取噬菌体库构建所需的宿主菌、辅助噬菌体、表达载体,必要时对文库载体或表达载体进行改造便于后续项目的应用;

2、抗体库基因扩增尽可能获取所有目标抗体序列:每一种亚型都有显著的PCR条带;

3、1ug质粒转化100ul感受态细菌,转染效率在107-108以上;

4、噬菌体构建免疫库容量达到107-108或天然库1011以上;

5、在3-5个项目上获得特异性单克隆抗体5株以上;

6、在已获得抗体的基础上设计轻重链CDR随机突变或定点突变;核酸随机突变率1-3%,氨基酸定点突变率50%;

7、分别构建轻重链突变文库;

8、筛选获得轻重链突变亲和力明显提高克隆各5-10 株;

4、构建轻重链突变结合库;

5、筛选获得相对原始克隆亲和力显著提高的克隆5-10株;

6、抗体测序、亲和力测定及应用评估,在3-5个项目上获得抗体亲和力提高50-100倍或达到试剂灵敏度要求的克隆1-2株;

预期效果

  1. 抗体库基因扩增尽可能获取所有目标抗体序列:每一种亚型都有显著的PCR条带;
  2. 1ug质粒转化100ul感受态细菌,转染效率在107-108以上;
  3. 噬菌体构建免疫库容量达到107-108以上
  4. 在3-5个项目上获得特异性单克隆抗体5株以上;
  5. 在已获得抗体的基础上设计轻重链CDR随机突变或定点突变;核酸随机突变率1-3%,氨基酸定点突变率50%;
  6. 抗体测序、亲和力测定及应用评估,获得抗体亲和力提高50-100倍或达到试剂灵敏度要求的克隆1-2株;

解决该需求的原因

诊断单抗原料开发

重要程度

项目计划科技投入总额500万元

 已投入经费额 100万元  

计划支付技术转让(合作)费最高额100万元

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