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硫酸软骨素酶ABC产业化

该项目中硫酸软骨素ABC酶可降解硫酸软骨素A、硫酸软骨素B(硫酸皮肤素)和硫酸软骨素C,此酶通过β消除机理作用于二糖重复单元之间的β1-4糖苷上并将其切断;已成功克隆并在工程菌上表达,获得很高表达产量,酶活性较好,热稳定性较高。该技术适用于生物试剂公司、制药公司。

#生物医药
中试

技术详情

技术介绍

(一)硫酸软骨素酶ABC

硫酸软骨素ABC酶可降解硫酸软骨素A、硫酸软骨素B(硫酸皮肤素)和硫酸软骨素C。此酶通过β消除机理作用于二糖重复单元之间的β1-4糖苷上并将其切断。降解反应的产物为寡糖,主要是不饱和二糖。测定不饱和二糖产物即可对硫酸软骨素定量。

(二)中文名:硫酸软骨素ABC酶

酶学编号:EC 4.2.2.4

CAS编号:9024-13-9

来 源:基因重组酶

形 态:磷酸缓冲盐溶液(含50%甘油)

规格:5UN、10UN、25UN、50UN

纯 度:≥90%(SDS-PAGE)

储藏温度:-20℃下可保存12个月,于4℃下可保存3个月以上的时间。

应用影响

该技术已成功克隆并在工程菌上表达,获得很高的表达产量,酶活性较好,热稳定性较高。 单位定义:一个酶活单位在pH 6.0和37℃条件下1 min可以从硫酸软骨素A催化产生1.0 μmol 2-乙酰氨基-2-脱氧-3-O-(β-D-吡喃葡萄糖醛酸-4-烯)-4-O-硫酸-D-半乳糖(ΔDi-4S)或从硫酸软骨素C催化产生1.0μmol 2-乙酰氨基-2-脱氧-3-O-(β-D-吡喃葡萄糖醛酸-4-烯)-6-O-硫酸-D-半乳糖(ΔDi-6S)。

检测方法:ABC酶降解硫酸软骨素A、B或C的产物可通过紫外可见分光光度计于波长232 nm处检测。

用途:可用于HPLC法测定硫酸软骨素含量;低分子硫酸软骨素酶法制备;肝素精制。

技术优势

1.菌株表达量较高;

2.酶活性较高;

3.热稳定性较高。

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